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何謂過柱子

 更新時間:2024-05-22 點擊量:1386

我們常說過柱子其實就是柱層析分離,也叫柱色譜,1903年由俄羅斯科學家第一次發明使用,其把植物色素的溶液經過粉碎的碳酸鈣粉末,發現從上到下在碳酸鈣粉末上有不同的色帶,通過對不同色帶的分開提取,得到了較純葉綠素,葉黃素等。

該方法經過經過百年的發展至今已經比較成熟,固定相也從單一的碳酸鈣粉末發展到了氧化鋁(又分為酸性、中性、堿性),硅膠,活性炭等,其中各大實驗室常用的便是硅膠,一般分為正相硅膠和反相硅膠!

固定相(硅膠)一般要經過純化和活性處理,顆粒大小應當均勻統一,理論上其顆粒越小、同單位質量表面積越大,吸附能力就越高,分離效果也就越好。但是實際使用中固定相的顆粒太小時往往會存在兩個情況,一個是其質更輕,容易飄散在空氣中(硅膠進入人體無法降解,越細越毒);二是顆粒小也會導致顆粒之間縫隙小,從而使溶劑的流速就太慢,耗時;以硅膠為例,目前已經商業化用量最大的硅膠尺寸為200-300目。

過柱手段這塊,除了前面說的正向循環制備,高效液相制備,過柱機這些自動分析的設備,手動過柱方面主要分為常壓過柱,減壓過柱,加壓過柱三種。

其中減壓過柱,因為洗脫劑流速過快,會損失大半部分塔板數,分離效果較差,適合分離TLC板子分的比較開的樣品,尤其適合產物只有一個大極性雜質的樣品;所有其大多數時間被用于化合物的預處理,過掉部分雜質后再仔細純化。要注意的是,使用過程中因為負壓帶來的溶劑揮發,會導致柱子外表面大量水珠凝結,對水敏感的化合物不要輕易嘗試。

常壓過柱是三者中分離效果更好的一種過柱方式,但是因為很多時候溶劑走的太慢,分離效果再好也會影響效率,所以這時候一般會給與壓力,這就是所謂加壓過柱;但這個壓力不宜過高,一般手動的用雙鏈球,自動的就用個養魚泵,兩者都可以改裝一下。

(內容來源:有機大菜仔)


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